摘要

D-Squame D100膠帶由美國Cuderm研究生產(chǎn)，是用涂有黏性材料的膠帶，粘貼在皮膚上，膠帶上的粘合劑能夠均勻充分地去除角質(zhì)層細(xì)胞，并高效定量地從膠帶中提取目標(biāo)分子，進(jìn)而觀察角質(zhì)層的生理和病理學(xué)變化。此技術(shù)被廣泛用于藥物、化妝品的動(dòng)力學(xué)研究和觀察活性物質(zhì)的滲透深度。

1、膠帶剝離法介紹

角質(zhì)層作為表皮的最表層，由高度特化的無核角質(zhì)細(xì)胞和填充在細(xì)胞間的脂類組成，主要功能是防止表皮水分丟失和外源性物質(zhì)的入侵。這種高度特異化的無核角質(zhì)細(xì)胞在 HE染色切片上呈均勻伊紅色，細(xì)胞輪廓不清，最表面的細(xì)胞連接松散，趨向脫落，稱為鱗屑。膠帶剝離法作為物理刺激模型以其評(píng)價(jià)周期短、可客觀定量評(píng)價(jià)等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用于體內(nèi)和體外皮膚模型以及人類和動(dòng)物皮膚。

2，膠帶剝離法操作步驟

首先，將D-Squame D100膠帶貼在皮膚上，避免折疊。當(dāng)從同一皮膚部位多次剝離時(shí)，可以用筆或模板標(biāo)記膠帶的位置。

再次，使用D-Squame D500壓力儀施加壓力5-15秒后，用鑷子快速撕下膠帶。使用壓力儀是為了增加表皮細(xì)胞與膠帶的粘附性并均勻采集。如需同一皮膚部位反復(fù)黏貼，為了提高角質(zhì)層剝離的均勻性，應(yīng)連續(xù)交替撕下D-Squame D100膠帶。

最后，將每條膠帶粘合面朝內(nèi)放入小瓶中，或放在D-SquameD120紙板上。

3，D-Squame D100膠帶剝離物的后處理及分析

第一，形態(tài)學(xué)或生物物理標(biāo)志物（例如角質(zhì)細(xì)胞硬度或拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)）可以直接在膠帶上測(cè)量。

第二，分子標(biāo)志物必須在分析測(cè)定前從膠帶中提取出來。提取溶劑的類型、提取技術(shù)（振蕩、渦旋或超聲波）以及獲取足夠大樣本所需的膠帶數(shù)量均取決于具體的生物標(biāo)志物。免疫標(biāo)志物和抗菌肽，可使用各種添加蛋白酶抑制劑或表面活性劑的裂解提取液。高親脂性標(biāo)志物（例如神經(jīng)酰胺或游離脂肪酸）通常需要使用不同極性的有機(jī)溶劑進(jìn)行多級(jí)提取。基因表達(dá)譜分析，通常使用RNA分離裂解緩沖液。

4，應(yīng)用

第一，測(cè)定各種皮膚病理中的生物標(biāo)志物；生物標(biāo)志物的研究主要集中在監(jiān)測(cè)治療效果和分型，以及分子領(lǐng)域RNA定量分析。

第二，評(píng)估藥物的皮膚吸收情況。

第三，誘導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)化皮膚屏障損傷。

綜上，D-Squame D100膠帶不但可以均勻高效的采集角質(zhì)層樣品，并且采集后過敏反應(yīng)低。同時(shí)D-Squame D100膠帶可以兼容蛋白質(zhì)測(cè)量設(shè)備-D-Squame D501，也可兼容D-Squame D500壓力儀，使樣品采集過程更加標(biāo)準(zhǔn)化，采集結(jié)果更穩(wěn)定和準(zhǔn)確。